02 酸化ストレス関連試薬

MDA Assay Kit

マロンジアルデヒド測定キット

細胞、組織中のMDA量を測定可能
操作時間を大幅に短縮

製品コード

M496　 MDA Assay Kit

容　量	メーカー希望小売価格	富士フイルム和光純薬
100 tests	￥33,200	341-09961

<使用回数の目安> 96-well plate 1枚

キット内容

100 tests	・Lysis Buffer ・Dilution Buffer ・Standard ・Substrate ・Antioxidant	6.5 ml×1 10 ml×1 200 μl×1 58 mg×1 200 μl×1

試験成績書

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性質

　マロンジアルデヒド(MDA)は、脂質過酸化物の分解物として生成される化合物であるため、細胞や組織サンプル中の脂質過酸化の指標として酸化ストレスやフェロトーシスなどの分野で測定されています。また、MDAは反応性アルデヒドと呼ばれアミノ基やチオール基と反応しタンパク質変性やDNA損傷を引き起こすため、がんや糖尿病など様々な疾患研究においても測定対象とされています。
　本キットは、TBARS法による検出を採用しており、MDA量に応じて発色したMDAとチオバルビツール酸の付加体の蛍光もしくは吸光度を測定することで、細胞内もしくは組織中のMDAを検出することができます。

マニュアル

技術情報

細胞、組織中のMDA量を測定可能

細胞を測定試料とする場合は、蛍光法で測定できます。組織を測定試料とする場合は、サンプル量や予想されるMDA含有量より蛍光法もしくは比色法から測定方法を選択できます。

	蛍光法	比色法	必要サンプル量	測定可能MDA濃度範囲
細胞	○	×	1-3×10⁷ cells	1-10 µmol/l
組織	○	○	蛍光法：10-30 mg 比色法：20-50 mg	蛍光法：1-10 µmol/l 比色法：1-50 µmol/l

蛍光法

比色法

必要サンプル量

測定可能MDA濃度範囲

細胞

○

1-3×10⁷ cells

1-10 µmol/l

組織

○

蛍光法：10-30 mg

比色法：20-50 mg

蛍光法：1-10 µmol/l

比色法：1-50 µmol/l

簡便な操作性

一般的なTBARS 法の測定キットでは、基質であるチオバルビツール酸の秤量と溶解のために高温での加温が必要となりますが、本キットでは秤量や加温溶解の操作が不要となっているため操作時間の大幅な短縮と秤量誤差による測定結果のバラつきを抑えることができます。

実験例：フェロトーシス誘導した細胞のMDA量測定

　xCT (Cystin/Glutamate transporter)阻害剤であるErastinを用いてフェロトーシスを誘導したHepG2細胞内のMDA量の変化を測定しました。併せて、同細胞におけるGSSG/GSH比、MDA、鉄(II)、ROS、脂質過酸化物の変化も各製品を用いて評価しました。結果、Erastin処理による細胞内のMDAの増加と細胞内GSSG/GSH比の減少、さらに細胞内のMDA、鉄(II)、ROS、脂質過酸化物の増加が確認されました。

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参考文献

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文献No.	対象サンプル	引用(リンク)
1	組織 (マウス海馬体)	K. Igarashi, H. Iwai, K. Tanaka, Y. Kuwahara, J. Kitanaka, N. Kitanaka, A. Kurimasa, K. Tomita, T. Sato, "Neuroprotective effect of oxytocin on cognitive dysfunction, DNA damage, and intracellular chloride disturbance in young mice after cranial irradiation", 2022, Biochem. Biophys. Res. Commun., doi:10.1016/j.bbrc.2022.04.099.
2	細胞 (HeLa)	J. Zhu, X. Wang, Y. Su, J. Shao, X. Song, W. Wang, L. Zhong, L. Gan, Y. Zhao, X. Dong, "Multifunctional nanolocks with GSH as the key for synergistic ferroptosis and anti-chemotherapeutic resistance", 2022, doi:10.1016/j.biomaterials.2022.121704.
3	細胞 (RAW 264.7)	B. Yang, G. Joe, W. Li, Y. Shimizu, H. Saeki, "Comparison of Maillard-Type Glycated Collagen with Alginate Oligosaccharide and Glucose: Its Characterization, Antioxidant Activity, and Cytoprotective Activity on H2O2-Induced Cell Oxidative Damage", 2022, doi:10.3390/foods11152374.
4	細胞 (HepG2)	L. Dong, Z. Jiang, L. Yang, F. Hu, W. Zheng, P. Xue, S. Jiang, M. E. Andersen, G. He, M. J. C. Crabbe, W. Qu, "The genotoxic potential of mixed nitrosamines in drinking water involves oxidative stress and Nrf2 activation", 2022, doi:10.1016/j.jhazmat.2021.128010.
5	細胞 (OMM-1)	C. Hou, L. Xiao, X. Ren, L. Cheng, B. Guo, M. Zhang, N. Yan., "EZH2-mediated H3K27me3 is a predictive biomarker and therapeutic target in uveal melanoma", 2022, Front. Genet., doi:10.3389/fgene.2022.1013475.
6	細胞 (ヒト歯肉線維芽細胞)	L. Xing, W. Dong, Y. Chen, W. Dai, X. Xiao, Z. Liu, X. Zhang, D. Bai, H. Xu, "Fibroblast ferroptosis is involved in periodontitis-induced tissue damage and bone loss", 2022, Int. Immunopharmacol., doi:10.1016/j.intimp.2022.109607.
7	細胞 (Huh7)	Y. Li, W. Yang, Y. Zheng, W. Dai, J. Ji, L. Wu, Z. Cheng, J. Zhang, J. Li, X. Xu, J. Wu, M. Yang, J. Feng and C. Guo, "Targeting fatty acid synthase modulates sensitivity of hepatocellular carcinoma to via ferroptosis", J. Exp. Clin. Cancer Res., 2023, doi:10.1186/s13046-022-02567-z.
8	組織 (ラット肝臓)	H. Liu, F. Yokoyaa, S. Ishizuka, "Metabolic alterations of the gut–liver axis induced by cholic acid contribute to hepatic steatosis in rats", Biochim. Biophys. Acta, Mol. Cell Biol. Lipids, 2023, doi:10.1016/j.bbalip.2023.159319.
9	細胞 (4T1)	J. Zhao, Y. Chen, T. X, S. Han, C. Li, Y. He, Y. He, G. Zhao, G. Zhao, T. Wang, L. Wang, T. Cheng, C. Wang and J. Wang, "Clustered Cobalt Nanodots Initiate Ferroptosis by Upregulating Heme Oxygenase 1 for Radiotherapy Sensitization", Small, 2023, doi:10.1002/smll.202206415.
10	組織 (マウス膵臓)	L. Liu, Y. Xie, G. Li, T. Zhang, Y. Sui, Z. Zhao, Y. Zhang, W. Yang, X. Geng, D. Xue, H. Chen, Y. Wang, T. Lu, L. Shang, Z. Li, L. Li, B. Sun, "Gut microbiota-derived alleviates acute pancreatitis by activating pancreatic SIRT3 signalling", Br. J. Pharmacol., 2023, doi:10.1111/bph.15980.
11	組織 (乳がん細胞)	Z. ZHu, H. Shen, J. Xu, Z. Fang, G. Wo, Y. Ma, K. Yang, Y. Wang, Q. Yu, J. Tang., "GATA3 mediates doxorubicin resistance by inhibiting CYB5R2-catalyzed iron reduction in breast cancer cells", 2023, doi:10.1016/j.drup.2023.100974.