01 細胞増殖/細胞毒性測定用試薬
10 酸化還元系発色試薬

1-Methoxy PES

1-Methoxy PES

電子メディエーター

  • 製品コード
    M470  1-Methoxy PES
  • CAS番号
    133395-54-7
  • 化学名
    1-Methoxy-5-ethylphenazinium ethylsulfate
  • 分子式・分子量
    C17H20N2O5S=364.42
容 量 本体価格
50 mg ¥20,000

性質

本品は、1-Methoxy PMSの溶液安定性を高めた電子メディエーターです。1-Methoxy PMSは酸化還元反応を利用した種々の検出系に汎用されている電子メディエーターで、中性~アルカリ性領域においては溶液安定性が低い性質を有しますが、本品は同領域での安定性が飛躍的に向上した電子メディエーターです。また、本品は安定な低分子化合物であるため、NADHを利用した反応系で汎用される酵素(ジアホラーゼ)と同等以上の熱安定性を示します。試薬溶液を長期間保存することが可能で溶液調製の簡便性も向上します。

技術情報

目的に応じた電子メディエーターを選択

電子メディエーターとして、PMS(フェナジンメトサルフェート)やメルドラブルーが以前より利用されていますが、これらは溶液中での安定性に課題がありました。小社では、光安定性を向上した1-Methoxy PMS をはじめ、中性~アルカリ環境下で安定な1-Methoxy PES、更にはバイオセンサー分野での使用が期待される酵素へ標識可能な電子メディエーターを取り揃えています。

製品名
PMS
1-Methoxy PMS
1-Methoxy PES
Amine-reactive PES
Thiol-reactive PES
製品コード
取扱いございません
水溶性
光安定性
(水溶液中)
×
pH 安定性
(水溶液中)
標識
×
×
×
NH2
SH 基
酸化還元電位
-
168.0 mV
169.5 mV
173.0 mV
162.5 mV

酸化還元電位は、標準水素電極基準に換算したものを記載しています。
 

<酸化還元電位の測定条件>

電子メディエーター濃度:1 mmol/L  溶媒:0.1 mol/L LiCl/DMSO

作用電極:GC(φ3 mm x 55 mm)

参照電極:Ag/AgCl (3 mol/L NaCl)

対極:Pt (φ0.5 mm x 50 mm) 開始電圧:400 mV

最大掃引電圧:400 mV

最小掃引電圧:-400 mV

掃引速度:100 mV/sec  

幅広いpH領域で安定: 1-Methoxy PMSとの比較

操作
メディエーター溶液を調製後、30℃で30日間保存した後、メディエーターの残存活性としてWST-8及びNADHと混合し、発色反応にて評価を行った。

結果
1-Methoxy PMSはpH6以上になると溶液の安定性は顕著に下がった。一方、1-Methoxy PESにおいては、pH8付近の溶液でも活性は維持される結果となった。

溶液状態で安定: ジアホラーゼとの比較

操作
1 mmol/L WST-8, 1% Triton X-100の50 mmol/L HEPES buffer (pH7.0)溶液に、1-Methoxy PES(終濃度2 μmol/L)またはジアホラーゼ (終濃度 0.05 U/mL)を加えたメディエーター溶液を調製した。
各メディエーター溶液 100 μLに200 μmol/L NADH(50 mmol/L HEPES buffer pH7.0)100 μLを加え、37℃で20分反応後のWSTホルマザン由来の吸光度(450 nm)を測定した。調製直後および調製後5 ℃で45日間保存した溶液を用いて測定し、吸光度の値からメディエーターの残存活性として安定性を比較した。

結果
ジアホラーゼにおいては、45日間保存後に約20%の低下がみられた。一方、1-Methoxy PESは調製直後と同等の活性を示した。

参考文献

参考文献を表示する

1) T. Yomo, H. Sawai, I. Urabe, Y. Yamada, H. Okada, "Synthesis and characterization of 1-substituted 5-alkylphenazine derivatives carrying functional groups", Eur. J. Biochem.., 1989, 179, 293.

取扱条件

規格
性状: 本品は、暗赤色~黒褐色粉末または結晶性粉末であり水に溶ける。
純度(HPLC): 98.0% 以上
水溶状: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件

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