02 酸化ストレス関連試薬

-SulfoBiotics- SSP4

-<i>SulfoBiotics</i>- SSP4

生体硫黄解析用試薬

  • 製品コード
    SB10  -SulfoBiotics- SSP4
  • CAS番号
    -
  • 化学名
    3',6'-Di(O-thiosalicyl)fluorescein
  • 分子式・分子量
    C34H20O7S2=604.65
容 量 本体価格
1 mg ¥29,000

性質

近年、硫黄原子が連結したパースルフィドやポリスルフィドのようなサルフェン硫黄 (Sulfane Sulfur) を含む分子種が生体内に多く存在していることが明らかにされている。このような分子種は、硫化水素の産生や貯蔵、放出だけでなく、S-スルフヒドリル化などのタンパク質内チオールをターゲットとしたシグナル伝達にも関与していることが示唆されており、非常に注目されている。SSP4 (Sulfane Sulfur Probe 4) は、サルフェン硫黄と特異的に反応して強い蛍光を発する試薬であり、サルフェン硫黄の蛍光検出や細胞内解析に利用することが可能である。

※サルフェン硫黄とは、硫黄原子にのみ共有結合した硫黄の総称である。
※本試薬を細胞内サルフェン硫黄含有分子の解析に使用する場合、試薬を細胞内に導入するためカチオン性界面活性剤であるCetyltrimethylammonium bromide(CTAB)を使用します。そのため、ライブセルイメージングには適用できません。


特長
1. サルフェン硫黄と反応して強い蛍光を発する(λex=482 nm, λem=515 nm)
2. サルフェン硫黄との反応選択性が高い(硫化水素、グルタチオン、システインには反応しない)
3. 細胞内イメージングへの適用が可能

開発元 Dojindo Molecular Technologies, Inc.

マニュアル

技術情報

検出原理

生体内に存在するサルフェン硫黄含有分子種

※生体内のサルフェン硫黄含有分子種は、酸化還元および転移によって変化する
 

サルフェン硫黄との反応によるSSP4の蛍光スペクトル変化

※SSP4 10 μmol/L (PBS)にサルフェン硫黄ドナーであるNa2S3(Sodium trisulfide)を添加(終濃度 100 μmol/L)

SSP4の反応選択性

※SSP4 10 μmol/L (PBS)中の各活性種(100 μmol/L)に対する反応性 (Y軸:Blankを1とした場合の蛍光強度比の値)

SSP4を用いたサルフェン硫黄含有分子種の細胞内イメージング

   
左: 処理をしていないCHO細胞
右: サルフェン硫黄ドナーであるNa2S3(Sodium trisulfide)で処理したCHO細胞

-注意- SSP4はデタージェントによってバックグランド蛍光を発する場合があります。


※SSP4 10 μmol/L (1% Detergent/PBS)中の515 nm蛍光強度(λex: 482 nm)をプレートリーダーを用いて測定

TritonX-100を使用する場合は、0.1%以下の濃度にしてください。 NP-40, Tween20は1%濃度でも使用可能ですが、それ以下に希釈することでバックグランド蛍光を抑制することが可能です。

溶解例

1 mg/mL (DMSO)

参考文献

参考文献を表示する

1) W. Chen, C. Liu, B. Peng, Y. Zhao, A. Pacheco, and M. Xian, “New fluorescent probe for sulfane sulfurs and the application in bioimaging”, Chem. Sci.20134, 2892.
2) T. Ida, T. Sawa, H. Ihara. Y. Tsuchiya, Y. Watanabe, Y. Kumagai, M. Suematsu, H. Motohashi, S. Fujii, T, Matsunaga, M. Yamamoto, K. Ono, N. O. Devarie-Baez, M. Xian, J. M Fukuto, and T. Akaike, “Reactive cysteine persulfides and S-polythiolation regulate oxidative stress and redox signaling”, Proc Natl Acad Sci U S A.2014111, 7606.
3) E. Marutani, M. Sakaguchi, W. Chen, K. Sasakura, J. Liu, M. Xian, K. Hanaoka, T. Nagano, and F. Ichinose, "Cytoprotective effects of hydrogen sulfide-releasing N-methyl-D-aspartate receptor antagonists mediated by intracellular sulfane sulfur", Med. Chem. Commun.20145, 1577.
4) M. Sakaguchi, E. Marutani, H-S. Shin, W. Chen, K. Hanaoka, M. Xian, and F. Ichinose, “Sodium Thiosulfate Attenuates Acute Lung Injury in Mice”, Anesthesiology, 2014121, 1248
5) Y. Kimura, Y. Toyofuku, S. Koike, N. Shibuya, N. Nagahara, D. Lefer, Y. Ogasawara, and H. Kimura, "Identification of H2S3 and H2S produced by 3-mercaptopyruvate sulfurtransferase in the brain"Nature Scientific Reports., 2015, 5, 14774.
6) E. DeLeon, Y. Gao, E. Huang, M. Arif, N. Arora, A. Divietro, S. Patel, K. Olson, "A case of mistaken identity: are reactive oxygen species actually reactive sulfide species?", Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol2016310(7), R549.
7) P. Yadav, M. Martinov, V. Vitvitsky, J. Seravalli, R. Wedmann, M. Filipovic, and R. Banerjee, "Biosynthesis and Reactivity of Cysteine Persulfides in Signaling"Jounal of the American Chemical Society., 2016, 138, (1), 289.
8)A. Moustafa, Y. Habara, "Reciprocal interaction among gasotransmitters in isolated pancreatic β-cells"Free Radical Biology and Medicine., 2016, 90, 47.
9) A. Moustafa and Y. Habara, "Crosstalk between polysulfide and nitric oxide in rat peritoneal mast cells", Am. J. Physiol. Cell Physiol., (in press)
10) E. R. DeLeon, Y. Gao, E. Huang, M. Arif, N. Arora, A. Divietro, S. Patel, and K. R. Olson , "A case of mistaken identity: are reactive oxygen species actually reactive sulfide species?"American Journal of Physiology: Regulatory, Integrative and Comparative Physiology ., 2015, 310, (7), 549.
11) N. Takahashi, FY Wei, S. Watanabe, M. Hirayama, Y. Ohuchi, A. Fujimura, T. Kaitsuka, I. Ishii, T. Sawa, H. Nakayama, T. Akaike and K. Tomizawa, "Reactive sulfur species regulate tRNA methylthiolation and contribute to insulin secretion"Nucleic Acids Res., 2016, doi: 10.1093/nar/gkw745 .
12) D. Garai, BB. R. Gonzalez, PG. Furtmuller, JM. Fukuto, M. Xian, J. L. Garriga, C. Obinger and P. Nagy
"Mechanisms of myeloperoxidase catalyzed oxidation of H2S by H2O2 or O2 to produce potent protein Cys-polysulfide-inducing species."Free Radic. Biol. Med.., 2017, 113, 551.
13) Ningke Hou, Zhenzhen Yan, Kaili Fan, Huanjie Li, Rui Zhao, Yongzhen Xia, Luying Xun, Huaiwei Liu , 'OxyR senses sulfane sulfur and activates the genes for its removal in Escherichia coli', Redox Biology., 2019,doi.org/10.1016/j.redox.2019.101293 .

取扱条件

規格
性状: 本品は、白色~淡黄色粉末又は固体である。
純度(HPLC): 90.0% 以上
取扱条件
1.保存方法:冷凍,遮光

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