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commercial

老化細胞検出キット

Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER- β Gal

<特長>
  1. 固定化せずに簡便に老化細胞を検出
  2. 蛍光検出による定量解析が可能
  3. 固定化細胞を用いた多重染色に適用できる

 本製品は老化マーカーの 1 つとして広く用いられている SA- β -gal(senescence-associated β -galactosidase)を特異的に検出することができるキットです。キットに含まれる蛍光基質(SPiDER- β Gal)は優れた細胞膜透過性を有し、内在性 β - ガラクトシダーゼ活性を抑制する試薬と併用することで生細胞にも利用でき、フローサイトメトリーを用いた定量解析が可能です。

 細胞に Bafilomycin A1 を加え内在性 β - ガラクトシダーゼを抑制後、SPiDER- β Gal を加え蛍光顕微鏡観察やフローサイト測定に利用します。固定化細胞を用いる場合は、バッファー置換により内在性 β - ガラクトシダーゼの抑制を行います。詳細は小社 HP 掲載の取扱説明書をご覧ください。

 老化細胞モデルとして継代培養を繰り返した WI-38 細胞(Passage 10)を用い、本キットによる SA-β-gal の検出 a、異なる老化マーカーとして γ-H2AX(DNA 損傷マーカー) の免疫染色 b、更には全細胞の核染色(DAPI)cを行いました。その結果、SA-β-gal と γ-H2AX の両老化マーカーで相関する結果が得られました d

 継代数の異なる WI-38 細胞を核染色試薬(Hoechst 33342)で全細胞を染色し、SPiDER- β Gal で SA-β-gal を指標とした老化細胞を染色しました。その後、共焦点定量イメージングサイトメーター(横河電機株式会社 CQ1)を用い全細胞数に対し、SPiDER-β Gal で染色された老化細胞数の割合を算出し(左図)、陽性率として定量解析を行いました。 その結果、継代数の多い WI-38 細胞においては高い陽性率となりました(右図)。

品名 容量 希望納入価格(¥) メーカーコード
Cellular Senescence Detection Kit - SPiDER- β Gal 10 assays 38,000 SG03
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