MTT
還元系発色試薬・細胞増殖測定用試薬
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製品コードM009 MTT
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CAS番号298-93-1
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化学名3-(4,5-Dimethyl-2-thiazolyl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazolium bromide
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分子式・分子量C18H16BrN5S=414.32
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 100 mg | ￥4,300 | 345-01821 |
| 1 g | ￥19,600 | 341-01823 |
| 5 g | ￥69,400 | 349-01824 |
性質
メチルアルコールにはやや溶けるが、水、エチルアルコールにはわずかしか溶けない。エーテル、アセトン、酢酸エチルには全く溶けない。モノテトラゾリウムではあるがその性質が優れているため、TB、Nitro-TBなどが開発された後でもまだ広く利用されている。脱水素酵素によって赤紫色のホルマザン（λmax=565 nm、ε=2×104）を生ずる。コバルトキレートはλmax=660 nm（ε=2×104）となる。
※使用方法は、プロトコルをご覧ください。
技術情報
溶解例
100 mg/10 mL（熱メチルアルコール）
参考文献
1) T. F. Slater, B. Sawyer and U. Strauli, "Studies on Succinate-tetrazolium Reductase Systems III. Points of Coupling of Four Different Tetrazolium Salts", Biochim. Biophys. Acta., 1963, 77, 383.
2) T. Mosmann, "Rapid Colorimetric Assay for Cellular Growth and Survival: Application to Proliferation and Cytotoxicity Assays", J. Immunol. Methods, 1983, 65, 55.
3) H. Tada, O. Shiho, K. Kuroshima, M. Koyama and K. Tsukamoto, "An Improved Colorimetric Assay for Interleukin 2", J. Immunol. Methods, 1986, 93, 157.
4) M. C. Alley, D. A. Scudiero, A. Monks, M. L. Hursey, M. J. Czerwinski, D. L. Fine, B. J. Abbott, J. G. Mayo, R. H. Shoemaker and M. R. Boyd, "Feasibility of Drug Screening with Panels of Human Tumor Cell Lines Using a Microculture Tetrazolium Assay", Cancer Res., 1988, 48, 589.
5) E. Aoyama, N. Kobayashi, M. Shibata, T. Nakagawa and H. Tanaka, "Determination of Selenium by Flow Injection Analysis Based on the Selenium(III)-Catalyzed Reduction of 3-(4,5-Dimethyl-2-Thiazolyl)-2, 5-Diphenyl-2H Tetrazolium Bromide", Anal. Sci., 1991, 7, 103.
6) H. Yamaue, H. Tanimura, T. Tsunoda, M. Tani, M. Iwahashi, K. Noguchi, M. Tamai, T. Hotta and K. Arii, "Chemosensitivity Testing with Highly Purified Fresh Human Tumor Cells with the MTT Colorimetric Assay", Eur. J. Cancer, 1991, 27, 1258.
7) M. Kodama, T. Yoshida, H. Otani, K. Kohmoto and S. Nishimura, "Effect of AL-toxin Produced by Alternaria alternata Tomato Pathotype on Viability of Cultured Tomato Cells Determined by MTT-colorimetric Assay", Ann. Phytopathol. Soc. Jpn., 1991, 57, 663.
8) H. Yamaue, H. Tanimura, K. Noguchi, T. Hotta, M. Tani, T. Tsunoda, M. Iwahashi, M. Tamai and S. Iwakura, "Chemosensitivity Testing of Fresh Human Gastric Cancer with Highly Purified Tumour Cells Using the MTT Assay", Br. J. Cancer, 1992, 66, 794.
9) M. G. Stevens and S. C. Olsen, "Comparative Analysis of Using MTT and XTT in Colorimetric Assays for Quantitating Bovine Neutrophil Bactericidal Activity", J. Immunol. Methods, 1993, 157, 225.
10) M. Kodama, K. Inoue, H. Otani and K. Kohmoto, "Cultivar-specific and Non-specific Responses in Tomato Cell Cultures to AL-toxin from Alternaria alternata Tomato Pathotype", Ann. Phytopathol. Soc. Jpn., 1995, 61, 582.
11) 渡邉正己, "細胞増殖測定法", 組織培養, 1995, 21(12), 435.
12) H. Yamaue, H. Tanimura, M. Nakamori, K. Noguchi, M. Iwahashi, M. Tani, T. Hotta, K. Murakami and K. Ishimoto, "Clinical Evaluation of Chemosensitivity Testing for Patients with Colorectal Cancer Using MTT Assay", Dis. Colon Rectum, 1996, 39, 416.
13) T. Hotta, H. Tanimura, H. Yamaue, M. Iwahashi, M. Tani, T. Tsunoda, M. Tamai, K. Noguchi, S. Mizobata, K. Arii and H. Terasawa, "Tamoxifen Circumvents the Multidrug Resistance in Fresh Human Gastrointestinal Cancer Cells", J. Surg. Res., 1996, 66, 31.
よくある質問
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Q
反応後の生成物であるMTTホルマザンを溶解するために塩酸/iso-propanolを添加しますが 塩酸/iso-propanol を添加する前に培地を抜かなければいけませんか？ 生成しているMTTホルマザンまで除去されそうで心配です。
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A
「出来る限り」培地を抜いてください。
MTTホルマザンは非常に難溶で、培地や緩衝液が残っていることで溶解性がさらに落ちます。
（血清などの培養成分により、不溶性の沈殿物が生じることもあります）ホルマザンや細胞をプレートの底に沈めることで、培地の吸引除去の際の影響は幾分回避できます。
プレートを遠心にかけて、培地の除去を行ってください。また、塩酸/iso-propanolでもMTTホルマザンの溶解が十分でない場合には『DMSO』を使用することもできます。
取扱条件
| 性状： | 本品は、黄色～黄橙色粉末であり水には僅かしか溶けないが、メチルアルコールには溶ける。 |
|---|---|
| 純度(吸光度)： | 97.0％ 以上 |
| メチルアルコール溶状： | 試験適合 |
| モル吸光係数： | 8,250 以上(375 nm付近) |
| 鋭敏度： | 試験適合 |
| 融点： | 190～205℃(分解) |
| 強熱残分(硫酸塩)： | 0.10％ 以下 |
| IRスペクトル： | 試験適合 |
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