ミトコンドリア研究用試薬の比較

細胞内で重要な機能を持つミトコンドリアは、酸化的リン酸化によるATP産生の場であるだけでなく、その活性や機能障害が癌や老化、アルツハイマーやパーキンソン病等の神経変性疾患などと密接に関与しており、ミトコンドリアの状態を理解することは特に重要視されています。

 

 

試薬の選び方:ミトコンドリア解析 30秒紹介

音声が流れます

セミナー本編ではミトコンドリア解析法からとくに重要な指標と測定意義について、実験例を交えてご紹介します。

試薬の選び方:細胞内代謝動画はこちら

 

細胞内で重要な機能を持つミトコンドリアは、酸化的リン酸化によるATP産生の場であるだけでなく、その活性や機能障害が癌や老化、アルツハイマーやパーキンソン病等の神経変性疾患などと密接に関与しており、ミトコンドリアの状態を理解することは特に重要視されています。

 下記表では、ミトコンドリア研究用試薬として、損傷ミトコンドリアの品質管理システムであるマイトファジー検出(Mitophagy Detection Kit, Keima-Red)をはじめ、ROS:活性酸素種の検出(Si-DMAmtSOX、MitoSOX)およびROSにより酸化を受け生じた過酸化脂質などの脂溶性過酸化物の検出(MitoPeDPP)、更にはミトコンドリア染色用および膜電位依存的な各種蛍光プローブ(MitoBright LTシリーズ [Green] [Red] [Deep Red])、MitoBright IM、MitoTrackerシリーズ、Rhodamine 123JC-1MT-1)の特徴を紹介しています。

マイトファジーおよび酸化ストレス関連研究用試薬

検出対象 マイトファジー 脂溶性過酸化物 一重項酸素 スーパーオキサイド

スーパーオキサイド

試薬名 Mitophagy Detection Kit*3 Keima-Red MitoPeDPP Si-DMA mtSOX 新製品! MitoSOX
検出原理

マイトファジーによる

ミトコンドリア内の

pH低下に応答して

蛍光が増大

マイトファジーによる

ミトコンドリア内の

pH低下に応答して

蛍光特性が変化

脂溶性過酸化物に

特異的に応答して

蛍光が増大

一重項酸素に

特異的に応答して

蛍光が増大

スーパーオキサイドに

特異的に応答して

蛍光が増大

スーパーオキサイドに

特異的に応答して

蛍光が増大

ミトコンドリア集積性
(共有結合)
-
(発現タンパク質)

(静電的相互作用)

(静電的相互作用)

(静電的相互作用)

(静電的相互作用)
生細胞の染色・観察
(染色後の固定)

(×)

(×)

(×)

(×)

(×)

(×)
固定細胞への染色・観察 × × × × × ×
励起/蛍光 (nm) 530/700  550 & 440/620 452/470 644/670 540/670 510/580
染色時間*1 30分~ *2 15分~ 45分~ 30分~ 10分~
同仁製品コード MD01 - M466 MT05 MT14 -

*1 試料の種類や試薬濃度に応じて変わる
*2 細胞に遺伝子導入しKeima発現株を構築
*3 キットコンポーネントMtphagy Dye[コード:MT02]を単品を販売しています。

膜電位および局在確認用試薬

検出対象 ミトコンドリアの膜電位差 ミトコンドリアの局在
試薬名 MT-1 JC-1 MitoBright LT series MitoBright IM 新製品! MitoTracker series Rhodamine 123
検出原理 JC-1よりも高感度な検出が可能で
固定化後の観察とモニタリングができる

ミトコンドリアの

膜電位に応答して

蛍光特性が変化

静電的相互作用で集積

静電的相互作用で集積

その後ミトコンドリアに固定されるため

膜透過処理も可能

静電的相互作用で集積 静電的相互作用で集積
生細胞の染色・観察
(染色後のPFA固定)

(〇)

(×)

()

()

()

(×)
染色後のMeOH固定 × × × × ×
固定細胞への染色・観察 × × × × × ×
細胞内長期滞留性 - - × × ×
血清入り培地中での染色 - - ×
励起/蛍光 (nm) 530-560/570-640 高い膜電位: 514/529
低い膜電位: 585/590
Green:493/508
Red:547/563
Deep Red:643/663
561/560-620 490/516 ~ 644/665 507/529
染色時間*1 30 分 10~60 分 10 分~ 30分~ 15~45 分 15 分~
同仁製品コード MT13 MT09 MT10  MT11  MT12 MT15 -- R233

*1 試料の種類や試薬濃度に応じて変わる

金属イオン検出試薬

検出対象 ミトコンドリアのCa ミトコンドリアの鉄
試薬名 Rhod 2-AM Mito-Ferro Green
検出原理 ミトコンドリアに集積後
細胞内Ca2+と結合し
蛍光強度が増大
鉄(II)イオンと選択的に
反応し強い蛍光を発する
ミトコンドリア集積性
(静電相互作用)

(静電相互作用)
生細胞の染色・観察
(染色後のPFA固定)

(×)

(×)
固定細胞への染色・観察 × ×
励起/蛍光 (nm) 553/576 505/535
染色時間*1 30~60分 30~
同仁製品コード R002 M489

製品分類一覧

分類一覧から探す