04 細胞内蛍光プローブ

Fura 2-AM special packaging

細胞内カルシウムイオン測定試薬

  • 製品コード
    F025  Fura 2-AM special packaging
  • CAS番号
    108964-32-5
  • 化学名
    1-[6-Amino-2-(5-carboxy-2-oxazolyl)-5-benzofuranyloxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N',N'-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
  • 分子式・分子量
    C44H47N3O24=1001.85
容 量 本体価格 富士フイルム
和光純薬
50 μg x 8 ¥20,600 348-05831

性質

Fura 2-AMは、Fura 2のカルボキシル基をアセトキシメチルエステル体として膜透過性を高めたものである。これを細胞懸濁液に混ぜるだけで容易に細胞内に取り込まれ、細胞内エステラーゼにより分解されてCa2+結合能を持つFura 2となる。試薬溶液の調製の際、微量を秤量することは手間がかかり、吸湿などで劣化する原因にもなりかねない。そこで、1 mmol/L Fura 2-AM(DMSO)溶液(Code:F016)や、使い易いように少量分包したFura 2-AM(special packaging)としている。special packagingには、溶解用DMSOが1 mL添付されている。

マニュアル

はじめての抗体標識プロトコル

死細胞数を測りたい(吸光測定)

Cytotoxicity LDH Assay Kit-WST を用いた細胞毒性試験の例を紹介

お役立ち情報

技術情報

溶液調製法

Fura 2-AM 50 μgに適量のDMSOを加え均一に溶解することで、ご希望の濃度に調製いただけます。
下表に加えるDMSO量とFura 2-AM濃度の関係を示しましたので、ご参照ください。

DMSO (μL) 10 20 30 40 50
濃度 (mmol/L) 5.0 2.5 1.7 1.3 1.0

※DMSOに溶解後は保存できません。使用直前にFura 2-AM溶液を調製し、速やかにご使用ください。

参考文献

参考文献を表示する

1) G. Grynkiewicz, M. Poenie and R. Y. Tsien, "A New Generation of Ca2+ Indicators with Greatly Improved Fluorescence Properties", J. Biol. Chem.1985260, 3440.
2) D. A. Williams, K. E. Fogarty, R. Y. Tsien and F. S. Fay, "Calcium Gradients in Single Smooth Muscle Cells Revealed by the Digital Imaging Microscope Using Fura-2", Nature1985318, 558.
3) R. Y. Tsien, T. J. Rink and M. Poenie, "Measurement of Cytosolic Free Ca2+ in Individual Small Cells Using Fluorescence Microscopy with Dual Excitation Wavelengths", Cell Calcium19856, 145.
4) D. A. Williams and F. S. Fay, "Intracellular Calibration of the Fluorescent Calcium Indicator Fura-2", Cell Calcium199011, 75.
5) W. Almers and E. Neher, "The Ca Signal from Fura-2 Loaded Mast Cells Depends Strongly on the Method of Dye-loading", FEBS Lett.1985192, 13.
6) G. H. R. Rao, J. D. Peller and J. G. White, "Measurement of Ionized Calcium in Blood Platelets with a New Generation Calcium Indicator", Biochem. Biophys. Res. Commun.1985132, 652.
7) H. Ozaki, K. Sato, T. Satoh and H. Karaki, "Simultaneous Recordings of Calcium Signals and Mechanical Activity Using Fluorescent Dye Fura 2 in Isolated Strips of Vascular Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol.198745, 429.
8) M. Mitsui, A. Abe, M. Tajimi and H. Karaki, "Leakage of the Fluorescent Ca2+ Indicator Fura-2 in Smooth Muscle", Jpn. J. Pharmacol.199361, 165.
9) 宮川厚夫, 牧野徹, 玉川彰, 尾崎一穂, "ビデオ画像処理を用いた蛍光性カルシウム指示薬Fura-2による細胞内遊離カルシウムイオン濃度分布の測定", 分析化学198938, 643.

よくある質問

Q

はじめて測定します。Ca2+プローブの原理や測定方法、トラブルシューティング法を分かり易く教えて下さい。

A

はじめて細胞内Ca2+測定をされる方を対象としたプロトコルを作成しております。
原理、Ca2+プローブの特徴、測定方法、トラブルシューティングの方法等を記載しておりますので、ご参照下さい。

下記リンクよりダウンロード可能です。

「はじめて細胞内Ca2+を測定する方へ -カスタマーサポート担当者の視点から-」

取扱条件

規格
性状: 本品は、黄色~橙黄色固体でジメチルスルホキシドに溶ける。
純度(HPLC): 98.0% 以上
蛍光スペクトル: 試験適合
NMRスペクトル: 試験適合
取扱条件
1.危険物第4類 第3石油類 危険等級Ⅲ, 2.火気厳禁 3.保存方法:冷凍,遮光
危険・有害
シンボルマーク
感嘆符

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