BCECF-AM
細胞内pH測定試薬
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製品コードB262 BCECF-AM
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CAS番号117464-70-7
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化学名3'-O-Acetyl-2',7'-bis(carboxyethyl)-4 or 5-carboxyfluorescein, diacetoxymethyl ester
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分子式・分子量C35H28O15=688.59
| 容 量 | メーカー希望 小売価格 |
富士フイルム 和光純薬 |
|---|---|---|
| 1 mg | ￥41,000 | 342-08411 |
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性質
BCECFのpKaは6.97で、pHと蛍光強度との間にはpH6.4～7.6の範囲内で直線関係がみられ、細胞内pH測定に適している。BCECFは励起光（500 nm）照射によって分解されない。BCECFは、イオン化しているために細胞膜を透過できないが、BCECF-AMは、疎水性が増大し容易に細胞膜を透過する。細胞内に入ったBCECF-AMはエステラーゼにより加水分解を受け、膜不透過性のBCECFに戻る。中性pH付近におけるBCECF-AMの蛍光（励起光波長500 nm）は微弱であるが、BCECFは強い蛍光を示すので、加水分解の過程を蛍光強度（蛍光波長530 nm）の変化としてモニターできる。
マニュアル
参考文献
1) R. A. Steinhardt and D. Mazia, "Development of K+-conductance and Membrane Potentials in Unfertilized Sea Urchin Eggs After Exposure to NH4OH", Nature, 1973, 241, 400.
2) T. J. Rink, R. Y. Tsien and T. Pozzan, "Cytoplasmic pH and Free Mg2+ in Lymphocytes", J. Cell Biol., 1982, 95, 189.
3) A. M. Paradiso, R. Y. Tsien and T. E. Machen, "Na+ -H+ Exchange in Gastric Glands as Measured with a Cytoplasmic-trapped, Fluorescent pH Indicator", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1984, 81, 7436.
4) S. Grinstein, B. Elder and W. Furuya, "Phorbol Ester-induces Changes of Cytoplasmic pH in Neutrophils: Role of Exocytosis in Na+ - H+ Exchange", Am. J. Physiol., 1985, 248, C379.
5) G. B. Zavoico, E. J. Cragoe and M. B. Feinstein, "Regulation of Intracellular pH in Human Platelets", J. Biol. Chem., 1986, 261(28), 13160.
6) G. R. Bright, W. Fisher, J. Rogowska and L. Taylor, "Fluorescence Ratio Imaging Microscopy: Temporal and Spatial Measurements of Cytoplasmic pH", J. Cell Biol., 1987, 104, 1019.
7) C. Aalkjaer and E. J. Gragoe Jr, "Intracellular pH Regulation in Resting and Contracting Segments of Rat Mesenteric Resistance Vessels", J. Physiol., 1988, 402, 391.
8) K. Tsujimoto, M. Semadeni, M. Huflejt and L. Packer, "Intracellular pH of Halobacteria Can Be Determined by the Fluorescent Dye 2',7'-bis(carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein", Biochem. Biophys. Res. Commun., 1988, 155, 123.
9) M. A. Kolber, R. R. Quinones, R. E. Gress and P. A. Henkart, "Measurament of Cytotoxicity by Target Cell Release and Retention of the Fluorescent Dye Bis-carboxyethyl-carboxyfluorescein(BCECF)", J. Immunol. Methods, 1988, 108, 255.
10) H. Harada, Y. Kanai, M. Anzai and Y. Suketa, "cAMP Activates Cl-/HCO3- Exchange for Regulation of Intracellular pH in Renal Epithelial Cells", Biochim. Biophys. Acta, 1991, 1092, 404.
11) C. C. Freudenrich, E. Murphy, L. A. Levy, R. E. London and M. Lieberman, "Intracellular pH Modulates Cytosolic Free Magnesium in Cultured Chicken Heart Cells", Am. J. Physiol., 1992, 262(4), C1024.
12) K. Khodakhah and D. Ogden, "Functional Heterogeneity of Calcium Release by Inositol Triphosphate in Single Purkinje Neurones, Cultured Cerebellar Astorocytes, and Peripheral Tissues", Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 1993, 90, 4976.
13) G. Boyarsky, C. Hanssen and L. A. Clyne, "Superiority of in vitro Over in vivo Calibrations of BCECF in Vascular Smooth Muscle Cells", FASEB J., 1996, 10, 1205.
14) S. A. Weston and C. R. Parish, "New Fluorescent Dyes for Lymphocyte Migration Studies Analysis by Flow Cytometry and Fluorescent Microscopy", J. Immunol. Methods, 1990, 133, 87.
15) L. S. D. Clerck, C. H. Bridts, A. M. Mertens, M. M. Moens and W. J. Stevens, "Use of Fluorescent Dyes in the Determination of Adherence of Human Leucocytes to Endothelial Cells and the Effects of Fluorochromes on Cellular Function", J. Immunol. Methods, 1994, 172, 115.
16)M. Hashimoto, S. Kimura, C. Kanno, Y. Yanagawa, T. Watanabe, J. Okabe, E. Takahashi, M. Nagano and H. Kitamura, "Macrophage ubiquitin‑specific protease 2 contributes to motility, hyperactivation, capacitation, and in vitro fertilization activity of mouse sperm”, Cellular and Molecular Life Sciences, 2020, doi: 10.1007/s00018-020-03683-9
取扱条件
| 性状： | 本品は、淡橙色～淡橙褐色粉末または固体で、DMSOおよびアセトニトリルに溶ける。 |
|---|---|
| 純度(HPLC)： | 90.0％ 以上 |
| 蛍光スペクトル： | 試験適合 |
| NMRスペクトル： | 試験適合 |
| 保存条件: 冷凍,遮光 , 取扱条件: 吸湿注意 |
