【開発中】グルコース細胞内取り込みアッセイキット

Glucose Uptake Assay Kit – Blue, – Green, – Red

　細胞の重要なエネルギー源であるグルコースの細胞内取り込み能力は、細胞の代謝活性の指標の一つとして利用されています。一般的にグルコースの細胞内取り込みをイメージングする試薬として 2-deoxy-2-[(7-nitro-2,1,3-benzoxadiazol-4-yl)amino]-D-glucose（2-NBDG）が、広く用いられていますが、蛍光が弱く、感度が低いという課題がありました。そこで小社では Green の他、これまでにない Red 及び Blue を含めた 3 種類の新規高感度グルコース細胞内取り込みアッセイ用蛍光プローブ Glucose Uptake Probe を開発しました。グルコースの細胞内取り込みを明瞭にイメージングすることができ、フローサイトメーターを用いた測定も可能です。また Green、Red は蛍光強度が高いためプレートリーダーでの測定も可能です。さらに小社が開発した Washing and Imaging（WI）solution を用いることで細胞からのプローブの漏出を抑制することができ、安定したデータを取得することが可能となりました。

＜グルコースの細胞内取り込みの可視化＞

　Wortmannin はエンドソームのリサイクリングやリソソームへの移行を阻害し、エンドソームの肥大化を惹起することが知られています。Wortmannin によるこれらの変化を ECGreen と初期エンドソームマーカータンパク質 Rab5-RFP（蛍光蛋白質）との共染色、および ECGreen とリソソーム染色試薬との共染色で確認しました。その結果、Wortmannin 添加時には ECGreen は肥大化したエンドソーム（Rab5-RFP）と共局在（左図：Merge）し、リソソームとは共局在しない（右図：Merge）ことが確認できました。上記の結果から、ECGreen は細胞内小胞輸送系の変化を可視化することができます。

＜高濃度グルコースによるグルコース取り込み能力の阻害実験＞

　Glucose Uptake Probe − Green とグルコースとの競合阻害実験を行った。高濃度（25 mmol/l）グルコース下では、Glucose Uptake Probe − Green の細胞内取り込みは阻害された。

＜インスリンによる脂肪細胞のグルコース取り込み促進＞

　インスリンによる脂肪細胞のグルコース取り込み能の促進を Glucose Uptake Probe – Green を用いて蛍光観察した。

　ご興味がございましたら、小社カスタマーサポート（info@dojindo.co.jp　Free Dial：0120-489548）までお問い合せください。