＜特長＞
･ 精製操作は約30分で完了
･ 高純度・高回収率
･ 1回につき50 μlの血清や腹水、200 μgの程度の抗体精製が可能
･ プロテインA/G固定化ゲルは約10回の再利用が可能
･ 小社ラベリングキットシリーズに適した量の抗体精製が可能
各種動物への免疫後に得られる腹水や血清などにはイムノグロブリンG（IgG）の他に、アルブミンなどのタンパク質が多く含まれており、総タンパク質量の60％以上を占めています。しかし、ほとんどのアッセイにおいて必要な成分はIgG画分のみであり、IgG以外のタンパク質成分を除去することによりバックグラウンドが低減し、アッセイ感度を上げることができます。また、酵素や蛍光標識などを行うためにはIgG画分のみへ精製することが必要とされます。
腹水や血清、培養上清中に含まれる抗体は、硫安塩析法、ゲル濾過法、イオン交換クロマト法、あるいはプロテインA/Gクロマト法などにより精製されます。IgG Purification Kit - A及びIgG Purification Kit - Gは、各種動物のIgGを単離、精製するためのキットです。キットにはプロテインAまたはプロテインG固定化ゲル、および各種緩衝液が含まれており、わずか30分でIgGを高純度、高回収率で精製することができます。
プロテインA/G固定化の担体としてはシリカゲルを採用しています。遠心後のプロテインA/G固定化ゲル上の残液量はごく少量であり、プロテインA/Gへの抗体結合後のゲル洗浄操作によって、プロテインA/G未結合の物質を完全に除去することができます。また、プロテインA/Gへ結合したIgGは溶出時の酸性条件下に長時間さらすことなく素早い溶出操作を行うことで、IgGの活性低下を最小限に抑えられます。
本キットは1回の精製につき50 μlの腹水や血清、200 μg程度のIgGの精製が可能です。
なお、プロテインA及びプロテインGに対するIgGの親和性は動物種により異なりますので、表1を参考にご選択ください。
＜キット内容＞
･ Protein A pack（またはProtein G pack） ･ Washing Buffer ･ Elution Buffer ･ Catching Buffer
＜本キット以外に必要なもの＞
･ マイクロピペッター ･ マイクロチューブ
･ 遠心機（マイクロチューブ用） ･ ボルテックスミキサー
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| 図1 精製手順 |
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表1 プロテインAおよびプロテインGに対するIgGの結合性
Dojindo Labeling Kitsは活性化試薬とFiltration tubeにより、抗体等を簡単に標識するためのキットです。前処理−反応−精製 までを全てフィルター上で行うことができ、3時間以内に標識体が 得られます。1回の標識操作で50〜200 μgのサンプルを処理することができます。Filtration tubeを用いた精製はゲルろ過や透析などに比べ標識体の回収率が高く、貴重なサンプルの標識に適 しています。キットには保存溶液が付属しており標識体を安定に 保存することができます。
| 品名 | 容量 | 本体価格（￥） | メーカーコード |
| Biotin Labeling Kit -NH2 | 3 samples | 12,000 | LK03 |
| Biotin Labeling Kit - SH | 3 samples | 12,000 | LK10 |
| Peroxidase Labeling Kit - NH2 | 3 samples | 17,000 | LK11 |
| Peroxidase Labeling Kit - SH | 3 samples | 17,000 | LK09 |
| Alkaline Phosphatase Labeling Kit - NH2 | 3 samples | 21,000 | LK12 |
| Alkaline Phosphatase Labeling Kit - SH | 3 samples | 21,000 | LK13 |
| Fluorescein Labeling Kit - NH2 | 3 samples | 21,000 | LK01 |
| Allophycocyanin Labeling Kit - NH2 | 3 samples | 43,000 | LK21 |
| B-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 | 3 samples | 43,000 | LK22 |
| R-Phycoerythrin Labeling Kit - NH2 | 3 samples | 43,000 | LK23 |
| Allophycocyanin Labeling Kit - SH | 3 samples | 38,000 | LK24 |
| B-Phycoerythrin Labeling Kit - SH | 3 samples | 38,000 | LK25 |
| R-Phycoerythrin Labeling Kit - SH | 3 samples | 38,000 | LK26 |