Fig. 1 ALP標識IgGの調製法
Alkaline Phosphatase(ALP)は、その基質特異性を利用し、Peroxidase と同様、免疫染色法やEnzyme Linked
Immunosorbent assay(ELISA)に汎用されています。ALP標識体は、過ヨウ素酸、グルタルアルデヒドまたはニ官能性架橋剤を 用い作製されますが、その合成操作は煩雑であり、且つクロマト グラフィーや透析のような手間のかかる精製が必要です。
Alkaline Phosphatase Labeling Kitsは、アミノ基あるいはSH基を有する分子にALPを標識するためのキットで、キット付 属のReactive ALPと標的分子を混合するだけで簡単にALP標識体を得ることができます。イムノグロブリン G (IgG)にALPを標識する場合、必要なIgGの量は50〜200 μgで、少量の標識体を調製するのに最適です。IgGだけではなく、 Fabﾕへの標識も可能です。また、IgGのような高分子タンパクだけでなく、低分子化 合物への標識も可能であり、広範な標識用途に利用できます。
＜特長＞
● 3時間以内にアルカリホスファターゼ標識体が調製できる。
● 高分子化合物（MW>50,000）および低分子化合物（MW<5,000）を標識できる。
● NH2-Reactive ALPと混合するだけでアルカリホスファターゼ標識体を形成する。
● Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
● 付属の保存溶液でALP標識体の長期保存ができる。
＜キット内容＞ 3サンプル標識用
NH2-Reactive ALP 100 μg×3本
Washing Buffer 4 ml×1本
Reaction Buffer 200 μl×1本
Storage Buffer 4 ml×1本
Filtration Tube 3本
Alkaline Phosphatase Labeling Kit-NH2は、アミノ基を有する分子にALPを標識するためのキットです。NH2-Reactive ALPは、活性エステル基を導入したALPです。アミノ基を有する標的分子と混合するだけで安定な共有結合を形成します。IgGのような高分子タンパクをサンプルに使用する場合、付属のFiltration Tubeを用いて簡単にサンプルの前処理を行うことができます(Fig. 1)。ALP活性や標識反応を阻害するような低分子化合物（リン酸やトリスなど）は、Filtration Tubeを用いた前処理によって除去されるため、透析やゲルろ過などの処理を行う必要がありません。また、本キットを用いて低分子化合物を標識する場合、未反応の低分子化合物は付属のFiltration Tubeを用いた精製操作により除去されるため、高純度の標識体を得ることができます。
本キットには標識に必要なすべての試薬と作製したALP標識体を保存するための溶液が含まれています。
Fig. 1 ALP標識IgGの調製法
| 品名 | 容量 | 本体価格（￥） | メーカーコード |
| Alkaline Phosphatase Labeling Kit-NH2 | 3 samples | 21,000 | LK12 |
＜特長＞
● 3時間以内にアルカリホスファターゼ標識体が調製できる。
● 高分子化合物（MW>50,000）および低分子化合物
（MW<5,000）を標識できる。
● SH-Reactive ALPと混合するだけでアルカリホスファターゼ標識体を形成する。
● 付属の還元剤を用いることで遊離SH基を持たないタンパク質へ の標識も可能 *。
● Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
● 付属の保存溶液でALP標識体の長期保存ができる。
* S-S結合の切断によってタンパク質の活性が失われる場合があります。
＜キット内容＞ 3サンプル標識用
SH-Reactive ALP 100 μg×3本
Reducing Agent 80 μg×3本
Solution A 4 ml×1本
Solution B 1 ml×1本
Reaction Buffer 200 μl×1本
Storage Buffer 4 ml×1本
Filtration Tube 3本
Alkaline Phosphatase Labeling Kit-SHは、SH基を有する分子にALPを標識するためのキットです。SH-Reactive ALPは、マレイミド基を導入したALPです。SH基を有する標的分子と混合するだけで安定な共有結合を形成します。標的タンパク質がSH基を持っていない場合には、付属の還元剤を用いて遊離SH基を調製することが可能です（ただし、S-S結合の切断によってタンパク質の活性が失われる場合があります）。IgGヒンジ領域のSH基を標識に利用すれば、抗体活性を損なわずにALPを標識することができます。
IgGのような高分子タンパクをサンプルに使用する場合、付属のFiltration Tubeを用いることで簡単にサンプルの前処理を行うことができます(Fig. 2)。ALP活性を阻害するような低分子化合物（リン酸など）は、Filtration Tubeを用いた前処理によって除去されるため、透析やゲルろ過などの処理を行う必要がありません。また、本キットを用いて低分子化合物を標識する場合、未反応の低分子化合物は付属のFiltration Tubeを用いた精製操作により除去されるため、高純度の標識体を得ることができます。
本キットには標識に必要なすべての試薬と作製した ALP標識体を保存するための溶液が含まれています。
Fig. 2 ALP標識還元IgGの調製法
| 品名 | 容量 | 本体価格（￥） | メーカーコード |
| Alkaline Phosphatase Labeling Kit-SH | 3 samples | 21,000 | LK13 |