サンプル(血清あるいは3-DG standard):1 ml
   ↓
内部標準物質添加
   0.005% pentanedione 0.05 ml
   ↓
脱蛋白
   6% perchloric acid 1 ml
   ↓
遠心分離:3000 rpm、20分間
   ↓
上清を中和
   sodium hydrogen carbonate 2 ml
   ↓
誘導体化反応
   0.1% 2.3-diaminonaphthaleneと反応(4℃、16h)
   ↓
抽出
   ethyl acetate 4 ml
   ↓
有機層を乾固
   ↓
0.2 mlメタノールにて再溶解後HPLCにて解析

Fig.2 Sample preparation