新製品

生物発光用発光物質

D-Luciferin K salt

〈特長〉

・量子収率の高い発光分析試薬である。
・カリウム塩であり水溶性が高い。

　

　発光分析は、発光物質が高エネルギー状態から分解される際に、 光を発生することを利用した分析方法です。
　発光分析には、非酵素系の化学発光や、発光の際に触媒として 酵素を必要とする生物発光が用いられています。luminolに代表さ れる化学発光は非酵素系で行なうことができるため、操作が簡便 に行なうことができるという利点があります。一方、ホタルやト ビイカなど自然界に見られる生物発光では、この酸化の過程、も しくは酸化体の分解の過程に酵素が関与することにより、非常に 高い量子収率で発光させるという利点があります。
　D-luciferinはホタルの発光基質であり、このD-luciferinを用い た生物発光では、 luciferase、ATP、マグネシウム存在下で発光量子収率が0.88であり、化学発光物質として代表的なluminolの20 倍以上です。
　D-luciferinの発光機構は、下に示すようにluciferaseにより ATPと反応した後、再びluciferaseを触媒として酸素分子により 酸化されペルオキシドが生成し、脱炭酸分解の過程で発光するも のです1)。

　また、coenzyme AやADPの添加等による発光の長寿命化が図られるなどして、D-luciferin−luciferase発光はその応用が広 がっています2)。
　全ての細胞の活動はATPの代謝を基盤として成り立っているこ とから、ATPに依存したD-luciferin−luciferase発光は細胞の活 性を表わします。このため、細胞増殖や細胞毒性のアッセイに利 用されています3)。また、細菌の数に比例することから汚染の度合 を表わす指標としても用いられています。
　この、 D-luciferin−luciferase発光を利用したアッセイ法は、ATP量の測定 ４)のみならず、ATPを産生する酵素の活性を測定す る種々のアッセイにも応用されています。以下にその例を示しま す。

　

また、近年、遺伝子工学の分野に、 D-luciferin−luciferase発光が用いられています。例えば、組み変えた遺伝子プロモーターの 発現効率を見る際に、ルシフェラーゼタンパク質を産生するベク ターを同時に組み込むことで、発現量に応じてD-luciferin−luciferase発光が見られます7)。このことから、遺伝子発現効率をモ ニターする手法として用いられて、レポーター・ジーン・アッセ イに利用されています8)。
　今回、弊社では水溶性を高めたD-Luciferin K saltを用意いたしました。D-luciferinフリー体は純水中にはほとんど溶解しません (1mmol/l以下)が、これをカリウム塩とすることで約150mmol/l の溶解性をもちます。

溶解性データ

D-Luciferin D-Luciferin K salt
純水中  1mmol/l以下 約150mmol/l
Tris Buffer (100mmol/l,pH7.8)  約20mmol/l  約150mmol/l
Tricine Buffer (100mmol/l,pH7.8) 約20mmol/l 約150mmol/l

　

　このようにD-Luciferin K saltはD-luciferinの溶解性を高めたもので、さらに扱いやすいものです。今後、様々な測定に用いら れることが期待されます。

　

参考文献

1) 鈴木喜隆, 化学と生物, 18, 169 (1980).
2) S. R. Ford, F. R. Leach, Methods Mol. Biol., 102, 3 (1998)
3) S. P. M. Crouch, R. Kozolowski, K. J. Slater, J. Fletcher, J. Immunol. Methods, 160, 81 (1993).
4) J. J. Lemasters, C. R. Hackenbrock, Methods Enzymol., 57, 36 (1978).
5) A. Lundin, Methods Enzymol., 57, 56 (1978).
6) 辻章夫, 前田昌子, Dojin News, No.65, p11 (1993).
7) V. T. Nguyen, M. Morange, O. Bensaude, Anal, Biochem., 171, 404 (1988).
8) J. Alam, J. L. Cook, Anal. Biochem., 188, 245 (1990).

　

品　　名 容量 　価格（￥） メーカーコード
D-Luciferin K salt 25mg 18,000 L226

　

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品　　名 容量 　価格（￥） メーカーコード
D-Luciferin 25mg 14,000 L221