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二次元電気泳動用タンパク質溶解剤
SpotRight™ シリーズ

＜特長＞
  • 難溶性タンパク質の溶解性能を向上
  • 変性剤･還元剤･界面活性剤は １ ボトルに含まれ、秤量・混合は不要
  • 溶液調製はセットに含まれるバッファーを加えるだけ＊
    試薬の溶解性も向上し、煩わしさを解消

 

　二次元電気泳動法は、タンパク質の網羅的解析法の一つとして欠かせない技術となっています。しかしながら、膜タンパク質に代表される疎水性タンパク質は、その溶解性の低さから二次元電気泳動での解析が困難とされています。SpotRight™ は、これらのタンパク質の溶解性能を向上させたタンパク質溶解剤です。タンパク質の溶解に必要な変性剤・界面活性剤・還元剤はプレミックスされています。溶解液の調製は、各 SpotRight™ の Reagent に、セットに含まれるバッファーを加えるだけです＊。　SpotRight™ を用いて溶解したタンパク質のサンプル溶液は、等電点電気泳動および二次元電気泳動に使用できます。SpotRight™-Trial は、界面活性剤の種類が異なる 4 つの試薬とバッファーで構成され、Reagent-I には電気泳動用のタンパク質溶解剤に汎用されている CHAPS が、Reagent- II，- III，- IV にはタンパク質の溶解性能を向上した界面活性剤が含まれています。

＊キャリアアンフォライトは別途添加していただく必要があります。

Fig.1 市販ミクロソームを用いた二次元電気泳動
Fig.2 タンパク質同定結果

 

〈Q&A〉

Q1： Reagent 1 ボトルでゲル何枚分、使用できますか？
A1： 指定量の Reconstitution Buffer に溶解していただくと、1.1 ml となります。電気泳動用のサンプル添加量は、ゲルサイズや染色方法によって異なりますので、ご使用のサンプル添加量で算出して下さい。
例）　ゲルサイズ 7 cm、サンプル添加量 125 μl
　　　 1.1 ml/0.125 ml = 約 8 枚分
※ SpotRight™ -I，II，III，Ⅳ には、それぞれ Reagent が 10 本ずつ含まれます。
※ カップローディング法の場合は、サンプル添加用とゲル膨潤用が必要となる為、
　　使用可能なゲルの枚数は少なくなります。
Q2： Reagent-I，II，III，Ⅳ はどう使い分ければよいのでしょうか？
A2： SpotRight™ は、界面活性剤の種類によって、4 つのタイプをご用意しております。
Reagent-I には電気泳動用のタンパク質溶解剤に汎用されている CHAPS、Reagent-II，III，Ⅳ にはタンパク質の溶解性能を向上した非イオン性の界面活性剤が含まれております。
ラット肝臓ミクロゾームをサンプルとした場合、I と比較して、II，III，Ⅳ では溶解性が向上し、塩基性タンパク質のスポット数が増加しています。
まずは、I～Ⅳの全てのタイプが入った SpotRight™ -Trial （メーカーコード：S351）でお試しいただき、目的のタンパク質に合ったタイプをご選択下さい。
Q3： 変性剤、還元剤、アルキル化剤は含まれていますか？
A3： 以下の試薬が含まれます。
変性剤：Urea, Thiourea、還元剤：DTT、アルキル化剤：含んでいません
Q4： SpotRight™ 溶解液は、保存可能ですか？
A4： キャリアアンフォライトやブロモフェノールブルーを添加しない状態であれば、−20℃ で 1ヶ月安定であることを確認しています。キャリアアンフォライトやブロモフェノールブルーを添加した状態では、保存しないで下さい。また、−20℃ で保存した溶解液は、凍結融解を繰り返さないで下さい。

 

〈市販ミクロソームを用いてSpotRight™ -Trial で可溶化されたタンパク質（一部抜粋）〉
SpotRight™ -Trial

 

＜セット内容＞
SpotRight™ -Trial Reagent-I × 1
Reagent-II × 1
Reagent-III × 1
Reagent-IV × 1
Reconstitution Buffer 5 ml × 1
SpotRight™ -Ⅰ Reagent-Ⅰ × 10
Reconstitution Buffer 5 ml × 2
SpotRight™ -II Reagent-II × 10
Reconstitution Buffer 5 ml × 2
SpotRight™ -III Reagent-III × 10
Reconstitution Buffer 5 ml × 2
SpotRight™ -IV Reagent-IV × 10
Reconstitution Buffer 5 ml × 2

 

品名 容量 希望納入価格（￥） メーカーコード
SpotRight™ - Trial 1 set 15,000 S351
SpotRight™ - I 1 ml ×10 25,000 S352
SpotRight™ - II 1 ml ×10 25,000 S353
SpotRight™ - III 1 ml ×10 25,000 S354
SpotRight™ - IV 1 ml ×10 25,000 S355

 

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