<特長>
● 2時間以内にビオチン標識体が調製できる。
● NH2-Reactive Biotinと混ぜるだけで、安定な共有結合を形成する。
● Filtration Tubeを用いた分離操作により高い回収率で標識体が得られる。
● 付属の保存溶液でビオチン標識体の長期保存ができる。
<キット内容> 3 サンプル標識用
NH2-Reactive Biotin 3本
Reaction Buffer 0.5 ml x 1本
WS Buffer 4 ml x 1本
Filtration Tube 3本
Biotin Labeling Kit - NH2は、アミノ基を有するタンパク質、特に抗体へビオチンを標識するためのキットです。キット付属の NH2-Reactive Biotinは、その分子内に活性エステル基を有しているため、アミノ基を有する標的分子と混合するだけで安定な共 有結合を形成します。イムノグロブリンG(IgG)のような高分子 タンパク質にビオチンを標識する場合、標識反応を阻害するよう な低分子化合物(トリスなど)や未反応のNH2 -Reactive Biotinは付属のFiltration Tubeを用いて容易に除去することができます。
*50〜200 μgのタンパク質を標識できます。
*分子量50,000以上のタンパク質にご使用できます。
品名 | 容量 | 本体価格(¥) | メーカーコード |
Biotin Labeling Kit-NH2 | 3 samples | 12,000 | LK03 |
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品名 | 容量 | 本体価格(¥) | メーカーコード |
Biotinylation Kit (Sulfo-OSu) | set | 35,800 | BK01 |
Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody (Clone#NO2G52) | 50 μg | 65,000 | AB02 |
<実験例1>サンドイッチELISA
Anti-CAT IgG 100 μgを本キットを用いてビオチン標識し、サンドイッチELISAによりChloramphenicol
Acetyltransferase (CAT)を検出した。本キットを用いて作成したビオチン標識抗体
を用いた場合、他社のビオチン化キットに比べ、1.5〜2倍高感度 であった。
Fig.1 Biotin Labeling
Kit-NH2、及び他社品Kitを用いて作成したビオチン標識
anti-CAT(Chloramphenicol Acetyltransferase)抗体を用いたELISA
<実験例2>免疫組織染色
Anti-Nitroguanosine monoclonal antibody(Clone#NO2G52) 50 μgを本キットを用いてビオチン標識し、肺高血圧剤(モノク ロタリン)を投与したラットの肺動脈凍結切片を染色した。肺動 脈近傍で8-ニトログアノシンが検出されており、モノクロタリン 投与により肺動脈周辺で引き起こされた炎症によるNO産生が示 唆された。
Fig.2 ビオチン標識Anti-Nitroguanosine monoclonal抗体を用いて染色した、肺高血圧剤(モノクロタリン)投与ラット肺動脈凍結切片の組織免疫染色像(×200、HRP標識ストレプトアビジン/DAB染色)
(画像提供:北里大学医療衛生学部微生物学教室 北里英郎教授)